鸡白痢沙门菌S06004△spiC突变株的构建与鉴定

• 作者: 刘欢 刘男男 李昱辰 潘志明 焦新安 耿士忠 郭荣显 钱珊珊
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡白痢沙门菌 spiC基因 基因敲除 自杀质粒
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 页码范围: 379-386
• 页数: 8页
• 分类号: S852.612
• 语种: 中文

摘要

为了研究spiC基因对鸡白痢沙门菌致病性的影响,采用同源重组方法构建该基因缺失株.以鸡白痢沙门菌S06004基因组DNA为模板,PCR扩增spiC基因上、下游DNA片段作为等位基因;将上游片段、卡那霉素抗性基因(KmR)及下游片段依次连接并克隆到pGMB151自杀性质粒上,构建重组自杀质粒pGMB151-△spiC/KmR,通过大肠杆菌x7213与鸡白痢沙门菌S06004固相杂交,将质粒转入S06004中,运用反向筛选法获得含KmR基因的spiC基因缺失株(△spiC/KmR);再使用编码FLP重组酶的温度敏感型质粒pCP20敲除KmR,获得无抗性△spiC.PCR鉴定和测序结果显示,spiC基因被成功缺失.血清型、生化特性、生长特性、耐药性等鉴定表明,S06004△spiC未发生理化特性改变.本研究成功构建了spiC基因缺失株S06004△spiC,为进一步研究鸡白痢沙门菌致病性变化及spiC基因的功能奠定了重要基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	焦新安		249	2602	25.0	38.0
2	潘志明		163	1328	20.0	28.0
3	耿士忠		38	211	9.0	13.0
4	刘欢		16	16	3.0	3.0
5	刘男男		1	0	0.0	0.0
6	郭荣显		2	19	1.0	2.0
7	钱珊珊		1	0	0.0	0.0
8	李昱辰		2	2	1.0	1.0