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目的:建立血浆叶酸受体自身抗体免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)的酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay ,ELISA)检测方法,并对其进行评价。方法:从正常人的胎盘样品中提取叶酸受体蛋白并将其纯化,以纯化的人源叶酸受体蛋白为包被蛋白,以单克隆抗体为检测二抗,建立血浆叶酸受体自身抗体IgG的间接ELISA检测方法,评价其灵敏度、精密度及稳定性。随机选取24例血浆标本,同时以商品化的牛源叶酸结合蛋白与本方法中提取的人源叶酸受体蛋白作为包被蛋白,采用ELISA方法分别检测血浆中叶酸受体抗体IgG的水平,比较两种方法的检测结果。结果:标准曲线可检测的IgG浓度范围为6.25×10-4~8.00×10-2(标准品采用健康人混合血浆,IgG浓度定为1),最低检测限为3.13×10-4,批内差异为2.74%~8.07%,批间差异为4.16%~8.23%。同一样本不同稀释倍数下IgG的检测结果均在可接受范围内,结果较稳定。血浆标本的牛源包被蛋白与人源包被蛋白检测方法对比结果显示两种方法高度相关,相关系数为0.954(P<0.001);人源包被蛋白检测结果比牛源包被蛋白高14%。结论:成功建立以人源叶酸受体蛋白作为包被蛋白、针对血浆叶酸受体自身抗体IgG水平的ELISA检测方法,该方法检测灵敏,重复性好,可用于大样本量的人群检测。
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文献信息
篇名 人叶酸受体自身抗体IgG酶联免疫吸附试验检测方法的建立及评价
来源期刊 北京大学学报医学版 学科
关键词 叶酸受体 自身抗体 酶联免疫吸附试验 免疫球蛋白G
年,卷(期) 2014,(3) 所属期刊栏目 技术方法
研究方向 页码范围 483-487
页数 5页 分类号 R169.1
字数 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1671-167X.2014.03.028
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 任爱国 北京大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系 76 717 16.0 21.0
2 王琳琳 北京大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系 24 56 4.0 6.0
6 袁悦 北京大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系 6 9 2.0 3.0
10 杨娜 北京大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系 3 7 1.0 2.0
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自身抗体
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免疫球蛋白G
研究起点
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北京大学学报医学版
双月刊
1671-167X
11-4691/R
大16开
1959-01-01
chi
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