酶联免疫吸附试验检测人叶酸受体抗体IgM方法的建立及评价

• 作者: 任爱国 叶荣伟 杨娜 王琳琳 袁悦
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 叶酸受体 叶酸受体自身抗体 酶联免疫吸附试验 IgM
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 410-414
• 页数: 5页
• 分类号: R17
• 语种: 中文
• DOI: 10.3881/j.issn.1000-503X.2014.04.011

摘要

目的 建立酶联免疫吸附试验(ELISA)检测人血浆叶酸受体抗体IgM的方法.方法 将从正常分娩健康产妇的胎盘中提取、纯化人叶酸受体蛋白稀释至5 ng/μl,作为抗原包被96孔板,以羊抗人IgM作为二抗,以健康人混合血浆作为标准品,浓度设定为1.采用ELISA检测人血浆叶酸受体抗体IgM水平,并评价该方法的灵敏度、精密度和稳定性.分别以人叶酸受体蛋白和牛源叶酸结合蛋白作为包被蛋白,检测24例健康新生儿母亲和20例神经管畸形患儿母亲的血浆标本叶酸受体抗体IgM水平,比较两种包被蛋白的检测结果.结果 ELISA方法可以检测的人血浆叶酸受体抗体IgM浓度为6.25×10-4～8.00×10-2,最低检测限为3.12×10-4.该方法检测高、中和低浓度血浆叶酸受体自身抗体IgM的批内差异分别为6.61％、3.50％和5.12％,批间差异分别为4.54％、5.49％和5.44％,此方法检测不同稀释倍数样品中叶酸受体自身抗体IgM浓度的测定值均在均数±10%范围内.人叶酸受体包被检测板测得的健康新生儿母亲(t=-11.9,P＜0.001)及神经管畸形患儿母亲(t=7.35,P＜0.001)的叶酸受体抗体IgM浓度均显著高于牛源叶酸结合蛋白包被检测板的测定值.结论 本研究成功建立了检测人血浆叶酸受体抗体IgM的ELISA方法,该方法以人叶酸受体蛋白作为包被蛋白,检测灵敏度高,精密度好,结果稳定.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	叶荣伟	北京大学生育健康研究所卫生部生育健康重点实验室北京大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系	45	507	14.0	20.0
2	王琳琳	北京大学生育健康研究所卫生部生育健康重点实验室北京大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系	24	56	4.0	6.0
3	袁悦	北京大学生育健康研究所卫生部生育健康重点实验室北京大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系	6	9	2.0	3.0
4	杨娜	北京大学生育健康研究所卫生部生育健康重点实验室北京大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系	3	7	1.0	2.0