微囊藻毒素-LR 超灵敏均相免疫分析方法的建立与优化

• 作者: 张艺 赵灿培 金坚 钮伟民 黄飚
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 微囊藻毒素 微囊藻毒素-LR 化学发光测定法 均相免疫分析
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 实验方法
• 页码范围: 432-437
• 页数: 6页
• 分类号: R965
• 字数: 3700字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2014.03.021

摘要

目的：基于多克隆抗体免疫分析，构建并优化一种超灵敏、均相的光激化学发光法（AlphaLISA），用以检测水体中微囊藻毒素（MC）-LR含量。方法采用竞争原理，MC-LR人工抗原偶联的发光微球与标准品或样品MC-LR共同竞争限量一抗，再被二抗捕获，然后再通过生物素-亲和素与感光微球形成成免疫复合物，此时感光微球与发光微球发生接近，则产生并传递能量，发出特殊荧光。选择了合适的一抗和二抗工作稀释度，比较缓冲体系和反应时间的作用，从而优化了反应条件。结果通过优化反应条件，即筛选合适的一抗和二抗反应浓度、缓冲体系和反应时间，从而构建了MC-LR AlphaLISA检测法，其总反应时间40 min，灵敏度0．006μg·L-1，可测线性范围0．006～5μg·L-1，变异系数小于10％，平均添加回收率107．7％，与MC-RR和MC-RY的交叉反应率分别为13．2％和0．91％。结论本研究方法灵敏度高，特异性好，免疫反应迅速，适用于多样本量水体的MC-LR检测。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金坚	江南大学药学院药物设计与分子药理室	196	1025	16.0	22.0
2	钮伟民	无锡市疾病预防控制中心检验部	35	383	10.0	18.0
3	黄飚	江苏省原子医学研究所卫生部核医学重点实验室江苏省分子核医学重点实验室	93	582	13.0	17.0
4	张艺	江南大学药学院药物设计与分子药理室	28	140	7.0	10.0
8	赵灿培	江南大学药学院药物设计与分子药理室	2	5	2.0	2.0