比格犬雌激素β受体RNA干扰实验细胞及PCR检测引物的筛选

• 作者: 刘冰 孙兆增 张勇 曾林 朱宇旌 栾新红 甘艺 胡仲明 赵彦斌 钟睿
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: ERβ基因 比格犬 筛选引物 细胞
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 42-45,51
• 页数: 5页
• 分类号: R33
• 字数: 2714字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969.j.issn.1671.7856.2014.002.010

摘要

目的 筛选用于比格犬ERβ基因RNA干扰实验的细胞和检测所用引物.方法 根据比格犬ERβ氨基末端区域和DNA结合区设计三对引物,用阳性质粒筛选最佳引物应用于RNA干扰效果检测,并利用293T、Hela和vero细胞的cDNA验证该引物的特异性.对这三种细胞内人ERβ基因的存在情况也进行了检测.结果 经过三次重复性实验之后,结果显示引物C36684扩增效率高,且没有非特异条带,该引物对293T、Hela和vero细胞cDNA扩增时同样没有非特异性条带,但293T细胞中存在人的ERβ基因.结论 引物C36684用于检测RNA干扰效率,而Hela细胞则作为RNA干扰实验的细胞工具.