高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒SHxx13/2013株的分离与鉴定

• 作者: 于海 周艳君 姜一峰 李丽薇 杨莘 王康 程群 童光志 童武 虞凌雪 高飞
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 PCR 分离 鉴定
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 页码范围: 32-38
• 页数: 7页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 3582字
• 语种: 中文

摘要

2013年初上海某猪场保育猪群中出现高热、呼吸障碍等临床表现，导致大部分发病猪死亡，为了确定此次猪群中爆发疫病的病原，本研究从发病猪群中随机采集了15份血液样品，利用RT-PCR方法对本次疫病病原进行了检测。结果显示，有11份临床样品呈现猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV）强阳性，且与高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（Highly pathogenic Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, HP-PRRSV）对照大小相一致。随后从阳性样品中选取SHxx13/2013在Marc-145细胞中进行病毒的分离与鉴定，结果显示SHxx13/2013在细胞接种后第1代即出现明显的细胞效应（cytopathic effect, CPE），其病变特征与高致病性PRRSV强毒HuN4株一致。对SHxx13/2013第5代细胞分离毒进行RT-PCR和IFA等特异性鉴定，结果显示该毒株为PRRSV分离株，其蚀斑形态和生长特性与强毒HuN4株相似。分段克隆该毒株全长基因进行测序和序列分析，结果显示，新分离的流行毒SHxx13/2013株全长基因组为15319 bp，其Nsp2基因特征与HP-PRRSV一致，在第482位和第534~562位发生两处共30个氨基酸的不连续缺失，且该毒株与高致病性PRRSV代表毒株HuN4亲缘关系较近，全长基因的核苷酸同源性为99.6%。本研究结果表明新分离的SHxx13/2013株属于高致病性PRRSV分离株，据此我们推测今年年初上海某猪场爆发的疫情主要是由HP-PRRSV感染所致。