小干扰RNA表达质粒沉默△Np73对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和凋亡的影响

• 作者: 卢颖 张佩 朱辰杰 李淑华 段思 王爽 王阳
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: △Np73 MDA-MB-231 RNA干扰 基因沉默 乳腺癌
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 312-317
• 页数: 6页
• 分类号: R392.12
• 字数: 5024字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2014.03.005

摘要

目的:探讨靶向△Np73的小干扰RNA表达质粒转染人乳腺癌细胞株MDA-MB-231对其增殖和凋亡活性的影响.方法:构建△Np73小干扰表达质粒,脂质体法转染人乳腺癌细胞株MDA-MB-231;荧光显微镜下观察转染细胞绿色荧光蛋白表达,计算转染效率;实时荧光定量PCR检测细胞转染质粒后△Np73和TAp73 mRNA的表达;共转染pcDNA3-HA/DNp73α表达质粒与△Np73小干扰质粒,Western blot检测细胞转染后△Np73和TAp73表达;CCK-8法检测转染质粒后细胞生长抑制率;caspase 3活性分光光度法检测转染质粒并应用阿霉素处理后细胞的凋亡水平.结果:成功构建并转染△Np73小干扰表达质粒,转染效率达60％.△Np73小干扰质粒转染细胞能有效抑制内源性△Np73 mRNA和外源性△Np73蛋白表达,对TAp73无显著抑制作用.经△Np73质粒干扰的细胞增殖活性显著下降,与空白对照组相比差异显著,阿霉素诱导△Np73质粒转染细胞凋亡水平增加,与阴性对照组相比有显著差异.结论:△Np73小干扰RNA表达质粒能显著降低MDA-MB-231细胞中△Np73 mRNA及蛋白的表达,抑制细胞生长增殖,增强其被阿霉素诱导的凋亡水平,表明靶向沉默△Np73可能为未来人乳腺癌的治疗提供了一个新的策略.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张佩	辽宁医学院免疫与病原生物学教研室	24	108	6.0	9.0
2	王阳	辽宁医学院免疫与病原生物学教研室	9	71	3.0	8.0
3	卢颖	辽宁医学院免疫与病原生物学教研室	18	44	3.0	5.0
4	李淑华	辽宁医学院免疫与病原生物学教研室	9	44	4.0	6.0
5	王爽		5	10	2.0	3.0
6	段思		2	1	1.0	1.0
7	朱辰杰		2	1	1.0	1.0