基于DPO引物特异性检测小肠结肠炎耶尔森氏菌的PCR方法

• 作者: 刘忠梅 吴岩 徐义刚 李丹丹 李苏龙
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 小肠结肠炎耶尔森氏菌 16S-23S rRNA DPO-PCR
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 507-510,520
• 页数: 5页
• 分类号: R378
• 字数: 3066字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2014.05.015

摘要

目的 引入一种设计简易、特异性强、退火温度范围宽的双启动寡核苷酸引物(dual-priming oligonucleotide,DPO)设计,建立基于DPO引物特异性检测小肠结肠炎耶尔森氏菌的PCR方法.方法 以小肠结肠炎耶尔森氏菌16S 23SrRNA基因为靶基因,设计一对DPO引物,经过PCR反应体系优化,建立小肠结肠炎耶尔森氏菌DPO-PCR检测方法.测定了检测灵敏度,以常规PCR方法作为参照,分析DP&PCR方法的特异性及退火温度.结果 建立的小肠结肠炎耶尔森氏菌DPO-PCR检测方法的灵敏度为1.43×102 CFU/mL;与常规PCR方法相比,DP&PCR方法在49～69℃退火温度范围内均能保持高效率扩增;特异性强,所测试17种病原菌中,仅小肠结肠炎耶尔森氏菌为阳性结果,且无非特异性扩增.结论 DPO-PCR方法不需要对引物参数特别是退火温度进行优化,特异性强,为致病微生物的快速准确检测提供了新方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐义刚	黑龙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心	33	254	9.0	13.0
2	刘忠梅	黑龙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心	20	113	7.0	8.0
3	李苏龙	黑龙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心	22	151	9.0	10.0
4	李丹丹	海南出入境检验检疫局检验检疫技术中心	41	185	8.0	10.0
5	吴岩	黑龙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心	27	313	9.0	17.0