与秀丽隐杆线虫氯离子通道CLH-1相互作用蛋白的构建:GFP-Trap技术和质谱分析

• 作者: 周子量 姜静 尹江安 蔡时青
• 来源期刊: 生理学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 氯通道 真核生物延伸因子 绿色荧光融合蛋白 质谱
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 341-348
• 页数: 8页
• 分类号: Q25
• 语种: 中文
• DOI: 10.13294/j.aps.2014.0041

摘要

氯离子通道是一类分布广泛的阴离子选择性通道家族蛋白,在细胞容积维持、细胞质内pH调节、蛋白运输、细胞迁移、增殖及分化等重要生理过程中扮演着多种角色.然而,目前有关其功能调控研究较少.本研究构建了表达电压门控氯离子通道CLH-1融合绿色荧光蛋白(CLH-1:GFP)的转基因线虫.CLH-1∷GFP主要表达在线虫头部神经元和身体后部肠道细胞中.利用最近发展起来的捕获GFP的GFP-Trap技术,从转基因线虫裂解液中捕获了可能调控氯离子通道CLH-1功能的相互作用蛋白.通过质谱鉴定,共有27个蛋白和CLH-1∷GFP一起被捕获下来.生化实验显示其中真核生物延伸因子1 (EEF-1)与CLH-1蛋白直接相互作用;并且,在和EEF-1共表达的情况下,CLH-1的蛋白水平显著上调.本结果表明利用线虫表达氯离子通道GFP融合蛋白,结合GFP-Trap和质谱分析技术,可以识别和电压门控氯离子通道相互作用蛋白,同时也表明EEF-1可以调控线虫CLH-1通道功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周子量	中国科学院上海生命科学研究院	1	0	0.0	0.0
2	姜静	中国科学院上海生命科学研究院	3	2	1.0	1.0
3	尹江安	中国科学院上海生命科学研究院	2	0	0.0	0.0
4	蔡时青	中国科学院上海生命科学研究院	4	69	2.0	4.0