羊莫氏巴贝斯虫细菌人工染色体(BAC)文库的构建

• 作者: 关贵全 张浩浩 曹阳 陈瑛 陈龙欣 马润林
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 巴贝斯虫 基因组 细菌人工染色体 文库
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 1324-1329
• 页数: 6页
• 分类号: S852.723
• 字数: 3780字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2014.08.017

摘要

为丰富巴贝斯虫基因组信息,选用感染中国羊的莫氏巴贝斯虫临潭株(Babesia motasi Lintan)为对象,将纯化的红细胞阶段虫体裂殖子包埋于低熔点琼脂糖,用蛋白酶K进行消化处理,得到巴贝斯虫基因组DNA,利用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分离大片段基因组DNA,将其与CopyControl pCClBAC Cloning-ready Vector进行连接并转化到EPI300TM Escherichia coli感受态细胞,成功构建了含有34 560个克隆的莫氏巴贝斯虫临潭株基因组细菌人工染色体(BAC)文库;文库的平均插入片段大小为70 kb,基因组覆盖度为×137,空载率均低于3％,且克隆稳定.该BAC文库的构建,为进一步绘制精细物理图谱、基因组测序、进化及利用比较基因组学筛选致病基因等方面的研究奠定了基础.