建立RQ-PCR方法检测急性早幼粒细胞白血病患者6种不同PML/RARα异构体

• 作者: 周剑波 徐昕 林江 王雅丽 钱军 韩兰秀
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 聚合酶链反应 急性早幼粒细胞白血病 PML/RARα 异构体
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 检验医学
• 页码范围: 324-327,332
• 页数: 5页
• 分类号: R783.5
• 字数: 2805字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13312/j.issn.1671-7783.y140135

摘要

目的:建立检测急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)患者PML/RARα融合基因6种特异性异构体(bcr1/2、P4R3、P46R3、bcr3及P2R3)的实时定量PCR(RQ-PCR)技术,并评价其特异性.方法:设计不同异构体的特异性引物和探针,建立异构体特异性RQ-PCR方法对6种特异性异构体PML/RARα阳性模板进行扩增,评价异构体定量检测的特异性,并检测10例APL患者中不同异构体的含量.结果:所建立的各异构体特异性RQ-PCR法最大敏感性均达10拷贝/μL,但其重复性较差,108～ 102拷贝/μL阳性模板的重复性良好,正常对照及空白对照无扩增信号,每个异构体特异性RQ-PCR均不能扩增其他异构体.5例长型(bcr1)和1例变异型(bcr2)阳性APL患者中bcr1/2异构体表达量为7.71％ ～89.71％(中位数13.70％),P4R3异构体表达量为0.71％ ～16.26％(中位数4.48％),P46R3异构体表达量为3.57％ ～ 14.09％(中位数6.33％).4例短型(bcr3)患者中bcr3异构体表达量为21.43％ ～ 197.04％(中位数100.69％),P2R3异构体表达量为0.34％ ～ 9.07％(中位数2.45％).1例短型患者经诱导治疗缓解后bcr3和P2R3异构体转录本明显下降,复发时又明显升高.结论:检测PML/RARα异构体特异性RQ-PCR方法敏感、可靠,可用于APL患者不同异构体的定量检测和微小残留病灶的随访监测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钱军	江苏大学附属人民医院血液科	39	111	5.0	8.0
2	林江	江苏大学附属人民医院血液科	39	103	5.0	7.0
3	韩兰秀	江苏大学附属人民医院血液科	10	33	3.0	5.0
5	王雅丽	江苏大学附属人民医院血液科	14	38	3.0	5.0
6	徐昕	东南大学医学院	19	92	5.0	9.0
7	周剑波	东南大学医学院	8	47	4.0	6.0