小鼠原代血管平滑肌细胞改良分离方法的建立

• 作者: 张正杨 易芳 王含彦 田瑞敏 陈建业
• 来源期刊: 海南医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 小鼠动脉血管 血管平滑肌细胞 组织块培养方法 原代细胞培养
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 302-306,312
• 页数: 6页
• 分类号: R329-3
• 字数: 4311字
• 语种: 中文

摘要

目的:建立方便、快速、高效的小鼠原代血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)的分离培养方法,为相关研究提供快速获取原代VSMC的方法技术.方法:分离小鼠主动脉,用Ⅰ型胶原酶消化血管组织去除内皮细胞等杂细胞;将血管切成1 mm2大小组织块种植于六孔细胞培养板孔底,用分离培养液诱导原代VSMC细胞的繁殖生长.光学显微镜观察细胞形态特征;免疫组化方法鉴定VSMC特异性蛋白α-SMA的表达;RT-PCR方法检测VSMC特异性蛋白α-SMA和SM22α的mRNA表达水平.结果:本方法分离原代VSMC,3d后可见长梭状VSMC从组织块边缘长出,7d后可以进行传代.光学显微镜观察显示,分离细胞具有平滑肌细胞(smooth muscle cell,SMC)形态特征;免疫组化分析显示,分离细胞α-SMA蛋白表达阳性;RT-PCR分析显示,分离细胞中a-SMA和SM22α在mRNA水平高表达.结论:本实验成功建立了一种简便、快捷、高效从组织块分离培养VSMC的改良方法,为快速获得原代VSMC提供了一种适用的方法技术.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈建业	川北医学院生化教研室	40	324	10.0	17.0
2	王含彦	川北医学院生化教研室	33	153	7.0	10.0
3	易芳	川北医学院生化教研室	24	74	4.0	7.0
4	田瑞敏	川北医学院药理教研室	13	37	3.0	5.0
5	张正杨	川北医学院生化教研室	1	2	1.0	1.0