高致病性2型猪链球菌截短型类枯草杆菌丝氨酸蛋白酶基因的鉴定和功能研究

• 作者: 姚新月 李明 殷素鹏 胡福泉 谭银玲 赵岩 钟秋 陈恬
• 来源期刊: 微生物学通报
• 关键词: 2型猪链球菌 类枯草杆菌丝氨酸蛋白酶 细胞壁相关蛋白
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 兽医微生物
• 页码范围: 304-311
• 语种: 中文
• DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130766

摘要

[目的]克隆表达高致病性2型猪链球菌05ZYH33株的SspA截短型基因,验证其是否具有酶学活性,并构建该基因的缺失突变株细菌,探讨其在2型猪链球菌致病过程中所起的作用.[方法]构建SS2的SspA截短型基因05SSU0811原核表达质粒,表达并纯化05 SSU0811蛋白,运用丝氨酸蛋白酶底物Succinyl-Ala-Ala-Pro-Phe-p-nitroanilide (pNa),通过显色反应检测表达产物的酶学活性;运用同源重组技术敲除05SSU0811基因,多重交叉PCR筛选敲除株并测序鉴定,动物试验分析05SSU0811基因缺失对细菌毒力的影响.[结果]成功表达并纯化05SSU0811蛋白,浓度约为3.5 g/L.丝氨酸蛋白酶活性测定试验证实其具有酶学活性;获得05SSU0811基因缺失突变株,小鼠攻毒试验表明,野生株攻毒的20只小鼠全部死亡,基因缺失突变株攻毒组死亡9只,死亡率45％,两组间死亡率有显著性差异.表明05 SSU0811基因缺失的菌株毒力较野生株明显下降.[结论]05SSU0811基因编码的截短型丝氨酸蛋白酶仍然具有酶学活性,SS2的截短型基因SspA在高致病性2型猪链球菌的致病性方面具有一定作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谭银玲	第三军医大学基础部微生物学教研室	40	159	7.0	11.0
2	李明	第三军医大学基础部微生物学教研室	30	82	5.0	8.0
3	胡福泉	第三军医大学基础部微生物学教研室	82	392	11.0	16.0
4	赵岩	第三军医大学基础部微生物学教研室	7	20	2.0	4.0
5	钟秋	第三军医大学基础部微生物学教研室	5	8	2.0	2.0
6	陈恬	第三军医大学基础部微生物学教研室	2	3	1.0	1.0
7	殷素鹏	第三军医大学基础部微生物学教研室	2	3	1.0	1.0
8	姚新月	第三军医大学基础部微生物学教研室	3	3	1.0	1.0