田鼠巴贝虫可溶性抗原组分分析及其初步应用

• 作者: 卢艳 司晨晨 张加 蔡玉春 陈家旭 陈韶红
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 田鼠巴贝虫 可溶性抗原 SDS-PAGE Western bolt ELISA
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 469-472,478
• 页数: 5页
• 分类号: R382
• 字数: 3711字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2014.05.008

摘要

目的 分析田鼠巴贝虫可溶性抗原,寻找可用于免疫诊断的有效抗原组分.方法 用田鼠巴贝虫感染BALB/c小鼠,待虫血症达高峰期时,收集田鼠巴贝虫虫体;采用超声法制备可溶性粗抗原(soluble babesia antigens,SBA)并包板,ELISA检测血清特异性IgG,评价SBA的免疫反应性、交叉反应性和特异性;以SDS-PAGE电泳分析SBA组分,并进行Western Blot,分析其与感染鼠血清的反应性.结果 SBA-ELISA法可检测早期感染(7 d)小鼠血清,且与恶性疟、间日疟弓形虫病阳性血清无交叉反应,显示出其较好的诊断敏感性和较高的特异性.通过SDS-PAGE分析,获得5条分子质量为72、66、60、53、43 kDa的主蛋白带和介于14.4～116 kDa的7条次带.经Western Blot分析,SBA有15个抗原组分能被阳性小鼠血清识别,以72、53、43、39、30 kDa蛋白组分反应较强.结论 以SBA建立的间接ELISA可用于巴贝虫感染的有效筛查工具;田鼠巴贝虫可溶性抗原组分中72、53、43、39、30KDa为比较理想的抗原组分.