三种连接子多肽对抗癌融合蛋白翻译后剪切效果比较研究

• 作者: 周志明 李红艳 杨冬梅 沈佳妮 潘强 王世兵 章康健 顾锦法
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 连接子多肽 IETD EEED F2A caspase活性
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 558-566
• 页数: 9页
• 分类号: Q2|Q7
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1206.2013.00489

摘要

IL-24和Smac为靶向癌症的多基因治疗研究中重要的候选基因.在构建IL-24和Smac双基因表达载体过程中,选择一个稳定高效的连接子非常关键.利用三个不同的连接子多肽序列IETD、EEED、F2A构建三个真核表达质粒pcDNA3.1(+)-IL-24-IETD-Smac、pcDNA3.1 (+)-IL-24-EEED-Smac、pcDNA3.1 (+)-IL-24-F2A-Smac,并联合5-氟尿嘧啶(5-FU)处理研究各连接子介导的融合蛋白剪切效果.上述实验结果表明,在三种IL-24-1inker-Smac双基因表达载体中,F2A连接子剪切效果最佳且与caspase活性成正相关.IETD、EEED连接子介导的融合蛋白都有一定的剪切,但IETD/EEED多肽影响了上游IL-24蛋白的半衰期,加速了剪切后IL-24蛋白的泛素化降解.本研究为构建靶向癌症应用的双基因或多基因载体提供了设计参考.