猪繁殖与呼吸综合征病毒TJM株Nsp2基因缺失片段的原核表达及免疫活性分析

• 作者: 温永俊 王凤雪 高维凡 黄双
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 Nsp2 基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 15-18
• 页数: 4页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 2983字
• 语种: 中文

摘要

猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）TJ 株在细胞克隆纯化后得到非结构蛋白2（Nsp2）缺失的致弱毒株TJM株，根据GenBank数据库中公布的PRRSV TJ株F3代全基因序列设计合成引物，采用 RT-PCR方法扩增了 PRRSV TJM 株缺失片段 dNsp2，利用原核表达载体 pGEX-6p-1构建重组质粒 GST-dNsp2，将重组质粒转入大肠埃希菌 BL21（DE3）中表达，获得了可溶性表达的融合蛋白（GST-dNsp2）。经亲和柱层析纯化后，得到纯化的GST-dNsp2蛋白，含量1．6 mg/mL。用PreScissionTM蛋白酶对融合蛋白GST-dNsp2进行解离，获得浓度为0．41 mg/mL的目的蛋白 dNsp2。对 GST-dNsp2及 dNsp2进行 West-ern blot鉴定，证明表达的蛋白具有良好的反应性。本研究获得的 GST-dNsp2及 dNsp2为 ELISA方法鉴别检测PRRSV TJ株与TJM株提供了基础资料。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	温永俊	中国农业科学院特产研究所吉林省特种经济动物分子生物学国家重点实验室	25	169	7.0	11.0
2	王凤雪	中国农业科学院特产研究所吉林省特种经济动物分子生物学国家重点实验室	24	128	7.0	9.0
3	高维凡		14	105	6.0	10.0
4	黄双		2	4	1.0	2.0