表达羊传染性脓疱病毒F1L基因的重组山羊痘病毒的构建与特性鉴定

• 作者: 张倩 张辉 李瑞芳 王震 纪太旺 赵庆亮 陈创夫
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 羊传染性脓疱病毒(Orfv) F1L基因 重组山羊痘病毒 生物学特性
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 侵染和免疫
• 页码范围: 813-820
• 分类号: S852
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.2014.07.012

摘要

[目的]本文旨在构建可表达羊传染性脓疱病毒F1L基因的重组山羊痘病毒,并对其生物学特性进行初步研究.[方法]将羊传染性脓疱病毒F1L基因与转移载体pUC-TK12连接,同时插入LacZ报告基因和一双向启动子;将重组转移载体转染已接种山羊痘病毒的BHK-21细胞,通过蓝白斑筛选、纯化,对重组病毒进行连续传代培养,应用PCR、间接免疫荧光和Western免疫印迹等方法进行鉴定,并对重组病毒进行不同温度、酸碱度、有机溶剂和紫外照射等处理,进行TCID50评价.rGpv-F1L免疫小鼠后,经酶联免疫吸附实验检测其特异性抗体水平.[结果]成功构建重组病毒转移载体pTL-F1L,将转移载体转染BHK-21细胞后,通过蚀斑纯化获得了可稳定遗传的rGpv-F1L.间接免疫荧光和Western免疫印迹检测发现其可稳定表达F1L蛋白.55℃30min或紫外照射1h即可灭活重组病毒,且其对强酸、强碱、有机溶剂等较敏感.接种重组山羊痘病毒的小鼠40d内机体可持续产生高水平的特异性抗体,与接种Gpv病毒组相比差异极显著(P＜0.01).[结论]本文获得了可稳定表达羊传染性脓疱病毒F1L的重组山羊痘病毒疫苗候选株,其具有良好的抗原性和生物学活性,为同时预防羊传染性脓疱病和羊痘提供新途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈创夫	石河子大学动物科技学院	192	732	14.0	17.0
2	王震	石河子大学动物科技学院	23	48	5.0	6.0
3	张倩	石河子大学动物科技学院	39	73	5.0	6.0
4	张辉	石河子大学动物科技学院	79	248	9.0	12.0
5	李瑞芳	石河子大学动物科技学院	4	27	3.0	4.0
6	赵庆亮	石河子大学动物科技学院	5	20	3.0	4.0
7	纪太旺	石河子大学动物科技学院	1	9	1.0	1.0