TK基因重组缺陷山羊痘病毒构建及其生物学特性鉴定

• 作者: 兰彬 李常挺 梁晟 苏娇秀 郑列丰 郑彦梓 郑敏 韦显凯
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 山羊痘病毒 TK基因 重组病毒 基因缺陷 生物学特性
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·水产·蚕桑
• 页码范围: 1552-1557
• 页数: 6页
• 分类号: S852.654
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2013.9.1552

摘要

[目的]利用同源重组技术构建TK基因缺陷的山羊痘病毒(GTPV)毒株,为研制出更安全、高效的GTPV弱毒疫苗和病毒载体提供备选毒株.[方法]采用PCR克隆GTPV AV41株TK基因(ORF56)及其侧翼基因组片段,在TK基因内部插入报告基因EGFP抗性基因gpt达盒,构建GTPV重组转移载体pTK-Eg.将重组转移载体pTK-Eg与GTPV AV41株共转染Vero细胞,通过空斑纯化筛选阳性重组病毒,鉴定其生长特性和遗传稳定性,并接种山羊评价其安全性和免疫原性.[结果]成功构建获得一株TK基因缺陷的重组病毒vTK-Eg.与亲本毒株GTPV AV41相比,vTK-Eg的生长特性及其形成的细胞病变均未发生显著改变,只是毒价略微下降100.5个数量级;在原代牛睾丸(BT)细胞上连续传代,至少在10代内保持遗传性状和病毒滴度稳定.接种vTK-Eg的山羊精神和食欲均正常,接种后体温升高和局部反应的严重程度均较接种亲本毒株GTPV AV41的山羊有所降低;vTK-Eg与GTPV AV41株诱导山羊产生的GTPV中和抗体水平无明显差异(P＞0.05).[结论]构建的TK基因重组缺陷病毒vTK-Eg具有良好的遗传稳定性和免疫原性,较亲本毒株其安全性也有所提高,可作为研制GTPV基因工程弱毒疫苗和活载体疫苗的备选毒株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑敏		33	115	6.0	8.0
2	梁晟		15	84	4.0	8.0
3	郑列丰		14	92	5.0	9.0
4	韦显凯		30	105	5.0	9.0
5	郑彦梓		4	6	2.0	2.0
6	兰彬		2	12	2.0	2.0
7	苏娇秀		1	4	1.0	1.0