山羊痘病毒059蛋白表达及鉴定

• 作者: 何川川 张雪萍 李有文 杨倩 童剑军 米丽开姆·托合提尼亚孜
• 来源期刊: 塔里木大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 羊痘病毒 059 基因 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 生物资源研究
• 页码范围: 12-18
• 页数: 7页
• 分类号: S852.65+4
• 字数: 3978字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0568.2019.01.003

摘要

为研究山羊痘病毒的059蛋白,本研究用PCR技术扩增山羊痘病毒THX株059基因,并构建了融合表达His标签的原核表达载体,测序鉴定并分析了059基因的核苷酸序列特征和推测的氨基酸序列结构特征,将重组质粒转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达,用SDS-PAGE和Western-blot鉴定其蛋白表达情况.结果成功扩增并构建了山羊痘病毒059基因的原核表达载体PET-42b-059,THX株059基因全长为765 bp,与参考株的相似性高达99.34％,与山羊痘病毒在亲缘关系上较近,而与疙瘩皮肤病病毒与绵羊痘病毒的亲缘关系较远.059蛋白会长255aa,由多个α螺旋和β片层交错构成,分子量大小为29 KDa,SDS-PAGE结果显示其以包涵体的形式表达,大小与理论相符,Western Blot结果证明059蛋白与His标签迸行了融合表达.结果表明059蛋白可以较好原核表达,为迸一步研究该蛋白的其他生物学特性奠定了基础.