表达小反刍兽疫病毒H基因的山羊痘病毒通用转移载体的构建及鉴定

• 作者: 卢晓丽 吴国华 崔丽凡 张强 李健 王建科 赵志荀 邵长春 颜新敏 高世功
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 羊痘病毒 H基因 转移载体 构建 鉴定
• 年，卷（期）: 2009,（20）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 9384-9386,9404
• 页数: 4页
• 分类号: S858.27
• 字数: 3676字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2009.20.030

摘要

[目的]研制小反刍兽疫羊痘活载体疫苗.[方法]利用PCR技术扩增小反刍兽疫病毒H基因,克隆到pGEM-T easy载体,Nhe Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切重组质粒,将目的片段插入到真核表达载体pEGFP-N1- P7.5中,得到重组载体pEGFP-N1-P7.5-H,重组载体Hind Ⅲ、Nhe Ⅰ双酶切片段EGFP-P7.5-H平末端连接到Kpn Ⅰ酶切后的载体pUC119-TK中,得到通用转移载体pUC119-TK-EGFP-P7.5-H.[结果]经酶切鉴定及PCR扩增检测,表明构建栽体正确.pUC119-TK-EGFP-P7.5-H转染羊痘病毒感染的BHK21细胞,48 h后报告基因表达.[结论]该研究为研制小反刍兽疫基因工程活载体疫苗奠定基础.