小反刍兽疫病毒F基因真核载体的构建与表达

• 作者: 岳城 张强 才学鹏 朱学亮 杨帆 窦永喜 骆学农
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 小反刍兽疫病毒 F基因 真核细胞表达载体 转染 免疫活性
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 405-409
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.5
• 字数: 4643字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2009.05.006

摘要

根据GenBank中小反刍兽疫病毒(Nigeria 75/I株)F基因序列设计了引物,应用RT-PCR方法获得了目的基因,纯化回收后将其连接到克隆载体pMD18-T上.将鉴定与序列测定后的目的基因再克隆到真核表达载体pEGFP-N1上,经过鉴定,成功构建了含有小反刍兽疫病毒F基因的真核细胞表达栽体pEGFP-N1-F.利用脂质体介导阳性pEGFP-N1-F质粒转染了BHK-21细胞.Western-blotting证实,表达的pEGFP-N1-F融合蛋白(90 ku)具有免疫活性.