小反刍兽疫07株H蛋白在昆虫细胞中的表达及其抗原性鉴定

• 作者: 刘春菊 包静月 王志亮 王淑娟 王清华 赵文年 雷程红
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 小反刍兽疫 H蛋白 杆状病毒表达系统
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 所属期刊栏目: 调查研究
• 页码范围: 3-5,中插1
• 页数: 4页
• 分类号: S852.695+5
• 语种: 中文

摘要

应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达小反刍兽疫病毒西藏分离株Tibet 07的血凝素蛋白,并对其抗原性进行鉴定.扩增小反刍兽疫病毒Tibet 07株H基因,克隆至pFastBac/CT-TOPO载体中,构建重组穿梭质粒pFastBac-PPRV-H,转化感受态大肠杆菌DH10BacTM,构建重组杆状病毒Bacmid-PPRV-H,转染sf9细胞,通过异源基因重组获得杆状病毒,通过病毒蚀斑试验检测扩增后病毒滴度.将P3代病毒以0.05MOI感染sf9细胞,通过SDS-PAGE鉴定H蛋白的表达,利用Western blot和间接免疫荧光鉴定H蛋白的抗原性.经过PCR、测序等证明重组杆状病毒Bacmid-PPRV-H构建正确.P2代重组杆状病毒的病毒滴度为1×10.表达的H蛋白在相对分子量约68 kDa处可见特异蛋白条带.感染的sf9细胞可与小反刍兽疫病毒H蛋白的单克隆抗体发生特异性反应.表明Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达了小反刍兽疫病毒西藏分离榇Tibet 07的血凝素蛋白,为进一步研究其生物学功能及构建检测ELISA试剂盒奠定了试验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王志亮		134	936	18.0	25.0
2	雷程红	新疆农业大学动物医学学院	60	123	6.0	7.0
3	包静月		18	209	8.0	14.0
4	刘春菊		13	115	5.0	10.0
5	王清华		9	42	3.0	6.0
6	王淑娟		16	65	4.0	7.0
7	赵文年	新疆农业大学动物医学学院	5	5	1.0	2.0