小反刍兽疫H蛋白主要抗原表位的原核表达

• 作者: 宋厚辉 王凤龙 王志亮 田晓灵 赵永刚
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 小反刍兽疫 H基因 表达 抗原位点
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 28-30
• 页数: 3页
• 分类号: S852.43
• 字数: 2577字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2009.03.015

摘要

目的 表达小反刍兽疫病毒H蛋白的主要抗原位点用于检测与预防. 方法 用DNAStar分析小反刍兽疫病毒H基因的主要抗原位点,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从病羊组织中扩增PPRV的H基因的主要抗原位点并克隆到原核表达载体PET-28b中,最后用PCR、酶切和测序分析对重组质粒进行鉴定;将重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta中,经不同浓度的IPTG诱导表达PPRV H基因的主要抗原位点:用SDS-PAGE和Western-blotting分析所有蛋白的表达.结果 将RT-PCR产物电泳,得到与预期大小相符的特异性片段;对重组质粒PET-28b-H66-249和PET-28b-H281-550酶切后,均出现预期相符的片段;DNA测序表明插入片段的序列与小反刍兽疫H蛋白基因完全一致,其大小分别为569bp和831bp;将重组表达的蛋白经SDS-PAGE和Western-blotting检测,证明所有的蛋白均得到表达.结论 成功表达了PPRV H基因的主要抗原蛋白,为日后的检测与预防工作奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王凤龙	内蒙古农业大学动物医学与科学学院	55	189	7.0	10.0
2	王志亮		134	936	18.0	25.0
3	赵永刚		34	155	7.0	11.0
4	宋厚辉	中国科学院青岛生物能源与过程研究所	6	14	3.0	3.0
5	田晓灵	内蒙古农业大学动物医学与科学学院	3	6	2.0	2.0