虎源猫泛白细胞减少症病毒VP2基因主要抗原表位区的原核表达和蛋白纯化

• 作者: 华育平 田丽红
• 来源期刊: 东北林业大学学报
• 关键词: 猫泛白细胞减少症病毒 VP2基因 抗原表位 原核表达 蛋白纯化 虎
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 97-100
• 分类号: S852
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-5382.2010.06.032

摘要

利用PCR技术从FPV-HLJ株病毒细胞培养物中扩增VP2基因主要抗原表位区片段VP2'.扩增片段克隆至pMD18-T载体,经核苷酸序列测定确认后,亚克隆于pGEX-6p-1原核表达载体,构建pGEX-6p-VP2'重组原核表达质粒.将该质粒转化至表达菌BL21(DE3)中用IPTG进行诱导表达.表达蛋白采用切胶法纯化,并用SDS-PAGE和Western blot检测纯化蛋白纯度和抗原特异性.结果表明,VP2基因全长1200bp,编码400个氨基酸.重组菌可表达相对分子量约为66kD的融合蛋白,包括目的蛋白40kD和GST标签26kD.该蛋白以包涵体形式存在,且GST融合蛋白具有良好抗原特异性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	华育平		91	551	12.0	17.0
2	田丽红		20	48	5.0	6.0