禽致病性大肠杆菌毒力基因多重PCR方法的建立和应用

• 作者: 丁铲 于圣青 孟庆美 戴建君 王少辉 韩先干 韩月
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 禽致病性大肠杆菌 毒力基因 多重PCR 检测
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 696-702
• 分类号: Q93
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.2014.06.013

摘要

[目的]建立禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)黏附相关基因、侵袭及毒素相关基因、抗血清存活相关基因及铁转运相关基因的多重PCR方法,实现禽致病性大肠杆菌毒力基因的简便、快速检测.[方法]根据GenBank公布的基因序列,设计合成18对特异性引物,通过条件优化,建立四组多重PCR体系,并通过模板倍比稀释检测各组多重PCR的灵敏性.利用多重PCR检测100株APEC毒力基因的分布,验证多重PCR方法的可行性.[结果]根据PCR扩增片段大小判定,上述四组多重PCR体系均能同时扩增出该组中的各个毒力基因,且灵敏度分别为:103 CFU、103 CFU、105 CFU、105 CFU细菌和1ng、1ng、10ng、10ng DNA.100株APEC的毒力因子检测结果显示,多重PCR和单基因PCR结果一致.[结论]建立的四组多重PCR方法能够简便、快速地检测禽致病性大肠杆菌的毒力基因,可用于毒力基因的鉴定以及流行病学调查.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩先干	中国农业科学院上海兽医研究所	31	220	9.0	14.0
2	丁铲	中国农业科学院上海兽医研究所	95	454	11.0	16.0
3	于圣青	中国农业科学院上海兽医研究所	53	286	9.0	14.0
4	戴建君	南京农业大学动物医学院	22	141	7.0	11.0
5	王少辉	中国农业科学院上海兽医研究所	18	76	6.0	8.0
6	孟庆美	南京农业大学动物医学院	1	18	1.0	1.0
10	韩月	中国农业科学院上海兽医研究所	2	23	2.0	2.0