乙型脑炎病毒基因组cDNA克隆在宿主菌中不稳定因子的初步研究

• 作者: 于海 刘飞 单同领 梁超 童光志 童武 郑旭晨 郑浩 郭亦非
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 乙型脑炎病毒 遗传不稳定性 潜在启动子 毒性蛋白编码序列位置
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 页码范围: 17-22
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 3698字
• 语种: 中文

摘要

为了探求乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus，JEV）基因组cDNA克隆在宿主菌中不稳定遗传的影响因子，本研究以猪源JEV HEN0701株基因组片段1~2913 bp为研究对象，分析基因组原核启动子和相关毒力基因在不稳定遗传中的作用。在5'端，分析片段中潜在的原核启动子序列，通过PCR扩增得到不同长度的cDNA片段；在3'端，通过内切酶酶切截断基因组prM蛋白或E蛋白编码区，获得3'末端不同的cDNA片段。将各片段克隆入pCR-BluntII-TOPO载体，转化大肠杆菌，于37℃条件下培养。结果显示，片段73~2913 bp、97~2913 bp、355~2913 bp及1~933 bp、1~1275 bp能够在转化菌中稳定遗传；含有其他片段39~2913 bp、54~2913 bp及1~1800 bp、1~1971 bp的重组细菌不能在37℃条件下生长；片段1~1600 bp虽然能够在转化菌中传代，但是出现不规律突变。以上结果表明：软件所预测各原核启动子片段中，基因组73~118 bp区域与cDNA克隆稳定性有关，且上游的54 bp至73 bp的序列对该区域启动子存在影响；在JEV基因组1275 bp至1600 bp之间可能存在毒性蛋白编码序列。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	童光志		168	2158	24.0	40.0
2	刘飞	中国农业科学院上海兽医研究所	20	166	5.0	12.0
3	童武	中国农业科学院上海兽医研究所	22	185	6.0	13.0
4	郑浩	中国农业科学院上海兽医研究所	20	161	5.0	12.0
5	梁超	中国农业科学院上海兽医研究所	4	8	1.0	2.0
6	郭亦非	中国农业科学院上海兽医研究所	4	3	1.0	1.0
7	于海	中国农业科学院上海兽医研究所	18	89	6.0	8.0
8	郑旭晨	中国农业科学院上海兽医研究所	4	3	1.0	1.0
9	单同领	中国农业科学院上海兽医研究所	8	104	2.0	8.0