肠道病毒EV71 IgM抗体参考品的建立

• 作者: 刘艳 国泰 夏宁邵 徐飞海 李长贵 王军志 范行良 葛胜祥 赵慧 高加梅
• 来源期刊: 微生物学免疫学进展
• 学科: 医学
• 关键词: EV71 IgM抗体 国家参考品
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 13-17
• 页数: 5页
• 分类号: R373.2
• 字数: 3378字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13309/j.cnki.pmi.2014.03.003

摘要

目的：建立肠道病毒EV71 IgM抗体检测用参考血清盘。方法通过收集手足口病感染早期患者的咽拭子和血清，对咽拭子病毒进行分离、鉴定、基因分型，通过血清中和试验及酶联免疫吸附试验(捕获法)的验证，确定EV71 IgM抗体阳性样品，组建EV71 IgM抗体参考血清盘，并经3家实验室对该参考血清盘进行协同标定和确认。结果12名患儿的咽拭子中均分离到EV71病毒，在RD细胞上引起细胞病变。通过套式PCR扩增、序列测定后进化树分析确认均为流行的C4基因亚型。每名患儿的双份血清均可中和EV71病毒，抗体效价为1∶512~1∶2048。通过捕获法进行EV71 IgM抗体检测结果均为阳性。以此12份样品为原料制备EV71 IgM抗体阳性参考品，同时以12份EV71 IgM抗体阴性血清制备阴性参考品，建立了由12份阳性参考品、12份阴性参考品、1份最低检出限参考品和1份精密性参考品组成的肠道病毒EV71 IgM抗体参考血清盘。通过3家实验室协同标定，各实验室间差异均无统计学意义。结论建立了EV71 IgM抗体检测参考血清盘，为相关检测试剂的质量控制和评价提供了参考标准。