下调环指蛋白2的表达促进U87脑胶质瘤细胞凋亡并增强其放射敏感性

• 作者: 周春辉 席文锦 张剑宁 杨安钢 杨帆 温伟红 王微 郑国旭 魏铭
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RNF2 胶质瘤 RNA干扰 放射敏感性
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 471-475
• 分类号: R739.41|R392-33|Q253|R730.55
• 语种: 中文

摘要

目的 在U87脑胶质瘤细胞中下调环指蛋白2(RNF2)的表达,观察对U87细胞生长及放射敏感性的影响.方法 用含有针对RNF2基因小发夹RNA (shRNA)的表达载体转染U87细胞,利用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法分别在mRNA及蛋白水平验证RNF2的表达下调,用MTT法检测细胞增殖,用annexin V-FTTC/PI标记结合流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期情况;经X射线照射后,用流式细胞术检测对照细胞和RNF2表达下调细胞的凋亡情况.结果 2条针对RNF2的shRNA均可有效抑制U87细胞中RNF2的表达.RNF2表达下调后,U87细胞的增殖受到显著抑制,S期细胞明显减少(shRNA-NC:27.31±1.35;shRNF2-1:16.72±2.90;shRNF2-3:10.35±1.33),G1期细胞显著增加(shRNA-NC:56.13士1.80;shRNF2-1:76.32±3.11;shRNF2-3:80.45±2.83),同时出现细胞凋亡.经X线照射后,RNF2下调的细胞凋亡率明显增加(shRNA-NC:20.88±0.64;shRNF2-1:39.69±0.57;shRNF2-3:47.82士0.45).结论 下调RNF2表达可明显抑制细胞生长,并增强U87细胞对放射的敏感性.