选择性MAO-B抑制剂TM-5对胶质瘤U87细胞自噬和凋亡的影响

• 作者: 武海博 梁燕 沈雷 范展 傅国惠 南阳市中心医院神经内科
• 来源期刊: 安徽医学
• 关键词: TM-5 选择性MAO-B抑制剂 胶质瘤 细胞增殖 细胞凋亡 自噬
• 年，卷（期）: 2024,（10）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 17-21
• 页数: 5页
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨选择性单胺氧化酶B(MAO-B)抑制剂TM-5对胶质瘤U87细胞体外自噬及凋亡的影响。方法 正常培养胶质瘤细胞株U87，随机分为6组：对照组不做处理，5、10、25、50、100μmoL/L TM-5组分别予以5、10、25、50、100μmoL/L TM-5处理细胞，每组设3个复孔。采用噻唑蓝（MTT）法检测细胞活力；流式细胞术检测细胞凋亡；实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测促凋亡蛋白Bcl-2相关蛋白X(Bax)、抑凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的基因表达；蛋白质免疫印迹（WB）检测细胞凋亡相关蛋白Bax和切割后半胱氨酸蛋白酶3(cleaved caspase-3)以及自噬相关标志蛋白Beclin-1、自噬相关蛋白1轻链-Ⅱ（LC3-Ⅱ）和P62表达。结果 与对照组比较，10、25、50、100μmoL/L TM-5组U87细胞存活率降低（P <0.05），选取5、10、25μmoL/L TM-5组（细胞存活率>50%）进行后续实验。与对照组比较，10、25μmoL/L TM-5组相对细胞凋亡率、细胞中LC3-Ⅱ和Bax蛋白相对表达量升高，差异有统计学意义（P <0.05）;5、10、25μmoL/L TM-5组U87细胞中促凋亡基因Bax mRNA相对表达水平、Beclin-1和cleaved caspase-3蛋白相对表达量升高，抑凋亡基因Bcl-2 mRNA、P62蛋白相对表达量降低，差异有统计学意义（P <0.05）。结论 TM-5可抑制胶质瘤U87细胞存活，可上调Beclin-1、LC3-Ⅱ、Bax和cleaved caspase-3，下调Bcl-2和P62表达，诱导细胞自噬和凋亡。