HMGB1基因沉默促进多柔比星诱导的胃癌BGC-823细胞自噬及凋亡

• 作者: 刘樑英 吴林青 张秋玉 章涛 许伟群 豆文利 韩艳非
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 高迁移率族蛋白1基因 多柔比星 短发夹RNA BGC-823细胞 胃癌 自噬 凋亡 耐药性
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 研究快报
• 页码范围: 610-616
• 分类号: R735.2|R730.54
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2014.06.002

摘要

目的:探讨高迁移率族蛋白1(high-mobility group box 1,HMGB1)基因沉默对化疗药物多柔比星(doxorubicin,DOX)诱导BGC-823胃癌细胞发生自噬和凋亡的影响.方法:MTT、Western blotting和激光共聚焦显微镜分别检测DOX对BGC-823细胞增殖及微管相关蛋白轻链3-Ⅰ(microtubule light chain-3 Ⅰ,LC3 Ⅰ)、LC3Ⅱ表达和自噬小体形成的影响.构建靶向HMGB1的shRNA载体pSuper-shHMGBl及其对照载体pSuper-shNC并转染BGC-823胃癌细胞,建立HMGB1稳定沉默的细胞系.DOX处理不同质粒转染组的BGC-823胃癌细胞,激光共聚焦显微镜观察HMGB1沉默对DOX诱导的自噬小体形成的影响,MTT法、流式细胞术分别检测对细胞增殖和凋亡的影响,Western blotting检测对自噬及凋亡相关蛋白(HMGB1、LC3、Bcl-2、Bcl-XL、Mcl-1和激活型caspase-3)表达的影响.结果:DOX可上调BGC-823细胞中LC3-Ⅱ蛋白的水平和促进细胞自噬体的形成(P＜0.01).与对照组相比,HMGB1基因沉默可减少DOX诱导的胃癌细胞自噬[(19.33 ±2.96)％ vs (71.67±3.38)％,P＜0.01],促进胃癌细胞发生凋亡[(46.12±3.15)％vs (12.37±2.84)％,P＜0.05],上调激活型caspase-3的表达水平.进一步分析发现,DOX诱导胃癌细胞发生自噬时,Mcl-1的降解增加,而Bcl-2和Bcl-XL表达无明显变化;HMGB1基因沉默可抑制DOX诱导的Mcl-1降解.结论:DOX可诱导BGC-823胃癌细胞发生自噬,HMGB1基因沉默有助于逆转胃癌细胞对DOX的耐药性,促进胃癌细胞发生凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘樑英	福建医科大学基础医学院免疫学系	12	30	4.0	4.0
2	许伟群	福建医科大学基础医学院免疫学系	16	43	5.0	5.0
3	吴林青	福建医科大学基础医学院免疫学系	11	22	3.0	4.0
4	韩艳非	福建医科大学基础医学院免疫学系	6	21	3.0	4.0
5	张秋玉	福建医科大学基础医学院免疫学系	14	56	5.0	6.0
9	豆文利	福建医科大学基础医学院免疫学系	1	5	1.0	1.0