下调53BP1基因表达对喉部鳞癌细胞放射增敏作用的研究

• 作者: 伍艳霞 李平 王前前 王竹 苟启桁 谢钰鑫
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 关键词: P53结合蛋白1基因(53BP1) 周期阻滞 放射敏感性 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 754-759
• 语种: 中文

摘要

目的 利用RNA干扰技术下调喉部鳞癌Hep-2细胞株P53结合蛋白1基因(53BP1)的表达,观察其对肿瘤细胞周期及放疗敏感性的影响.方法 构建53BP1短发夹RNA(shRNA)重组质粒,然后转染Hep-2细胞株,构建稳定低表达53BP1的Hep-2细胞系,通过Western blot检测转染空载质粒的Hep-2细胞(NC)、野生型Hep-2细胞(未转染,Hep-2组)和稳定转染下调53BP1表达的Hep-2细胞组(P6组)细胞53BP1蛋白的表达水平,MTT法检测转染对细胞正常情况下增殖的影响,通过流式细胞术检测经放射线照射后的细胞周期分布,并采用克隆形成实验检测下调53BP1表达的Hep-2细胞系对放射的敏感性变化.结果 成功构建了稳定低表达53BP1的Hep-2细胞株P6,Western blot显示P6组Hep-2相较野生型Hep-2细胞中53BP1蛋白水平下降(P＜0.05).MTT结果示下调53BP1蛋白表达并未影响细胞正常的生长.P6组下调53BP1后,经不同剂量放射后G2/M期周期阻滞较NC组和野生型Hep-2细胞减弱(P＜0.05),周期阻滞比例随放射剂量增加而增加.在0、2、6、10 Gy剂量的照射后,P6组放射敏感参数(D0、N、Dq、SF2)均低于野生型Hep-2组和对照组(P＜0.05).结论 RNA干扰可下调53BP1表达的Hep-2细胞,减少G2/M周期阻滞,从而增强对放射的敏感性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李平	四川大学华西医院肿瘤中心	122	463	12.0	15.0
2	王竹	四川大学华西医院肿瘤分子诊断实验室	90	484	14.0	18.0
3	王前前	四川大学华西医院肿瘤中心	2	1	1.0	1.0
4	苟启桁	四川大学华西医院肿瘤中心	1	1	1.0	1.0
5	谢钰鑫	四川大学华西医院肿瘤中心	1	1	1.0	1.0
6	伍艳霞	四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室	1	1	1.0	1.0