奶牛乳房炎3种主要致病菌三重PCR检测方法的建立

• 作者: 任怡静 何宝祥 左宗辉 杜向宏 杜玉兰 杨蓉 聂培 贺婷 陈亚明
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 质奶牛 乳房炎 PCR 诊断 致病菌
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 82-85
• 页数: 4页
• 分类号: S855.1
• 字数: 3183字
• 语种: 中文

摘要

金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和蜡样芽孢杆菌是引起奶牛乳房炎的三种常见致病菌,本研究根据金黄色葡萄球菌的nuc基因、大肠杆菌的16S-23SrRNA基因和蜡样芽孢杆菌的hblA基因,设计合成3对特异性引物,通过单纯PCR和多重PCR体系和条件优化,建立奶牛乳房炎主要致病菌三重PCR检测方法,并对50份临床乳房炎乳样分别用传统细菌学培养法和三重PCR方法进行对比检测.结果:建立的三重PCR方法能对同一样品中的3种病原菌以及与沙门氏菌等其他6种细菌的DNA模板进行扩增,均无交叉反应.对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和蜡样芽孢杆菌的检测灵敏度分别为0.1pg/uL、0.01pg/uL、0.1pg/uL.该PCR方法对50份临床乳房炎乳样检测结果,表面该方法的检出率比传统培养法的高.