禽致病性大肠杆菌噬菌体vB_EcoM_JS09裂解酶的表达及其活性分析

• 作者: 包红朵 周艳 张莉莉 张辉 王冉
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 革兰阴性菌 禽致病性大肠杆菌噬菌体 噬菌体裂解酶
• 年，卷（期）: 2014,（11）
• 页码范围: 1109-1113
• 页数: 5页
• 分类号: S852.612
• 语种: 中文

摘要

为研究禽致病性大肠杆菌噬菌体vB_EcoM_JS09编码的裂解酶对宿主大肠杆菌的裂解作用,克隆表达了禽致病性大肠杆菌噬菌体vB_EcoM_J S09的裂解酶,并检测了裂解酶的菌体内外裂解活性.利用PCR扩增了禽致病性大肠杆菌噬菌体vB_EcoM_JS09裂解酶基因(Lysin基因),构建了重组表达质粒pET-32a(+)-LysJS09,测序验证后转化至大肠杆菌BL21 (DE3)进行IPTG诱导表达.在37℃IPTG浓度为1.0 mmol/L诱导4h表达效果最好.重组融合蛋白LysJS09在BL21(DE3)中获得了高表达,在N端具有His标签,其分子质量约为38.9 ku.重组融合蛋白以分泌型方式表达,经His-trap HP(GE)亲和层析柱纯化后获得的重组蛋白LysJS09的纯度为97％.裂解活性试验表明,该裂解酶单独使用和加入EDTA (0.1mol/L)均无体外酶活性;但菌体内裂解试验表明,表达的裂解酶对宿主菌具有一定的裂解作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王冉		72	936	18.0	28.0
2	张辉		14	46	4.0	6.0
3	周艳		3	0	0.0	0.0
4	包红朵		7	9	2.0	3.0
5	张莉莉		3	0	0.0	0.0