一种大肠杆菌噬菌体新裂解酶的表达与活性检测?

• 作者: 冯新 吕萌 王爽 闫广谋 雷连成 顾敬敏
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 噬菌体裂解酶 大肠杆菌 绿脓杆菌 原核表达
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 页码范围: 211-215,220
• 页数: 6页
• 分类号: S852.6
• 字数: 3718字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13327/j.jjlau.2015.2522

摘要

前期分离得到1株具有较强裂解能力的大肠杆菌噬菌体vB＿EcoM?ep3。测序后发现，噬菌体vB＿EcoM?ep3的裂解酶基因在大肠杆菌噬菌体中尚未报道，能够编码一种新的裂解酶，并与绿脓杆菌噬菌体裂解酶具有很高同源性。为了探讨该裂解酶对大肠杆菌和绿脓杆菌的裂解活性，克隆了vB＿EcoM?ep3的裂解酶基因，经原核表达和纯化，体外评价了Lysep3裂解活性。结果表明：克隆裂解酶基因Lysep3长为492 bp；表达蛋白分子质量为17?7 ku；裂解酶单独作用时，对大肠杆菌和绿脓杆菌均不能裂解，但是能够显著抑制生长；与柠檬酸配合使用（0?5 mg／mL终浓度的Lysep3和0?5 mmol／L终浓度的柠檬酸），对大肠杆菌和绿脓杆菌均表现出较好的裂解能力，作用从2～24 h持续有效，细菌数量分别下降7?2倍和17?3倍。该结果表明，vB＿EcoM?ep3的裂解酶不但在基因序列上与绿脓杆菌存在进化关系，在功能上也具有相关性。该研究为解析裂解酶结构与功能的关系提供了一个良好的例证，同时有助于裂解酶的广谱性改造。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	雷连成	吉林大学动物医学学院	131	764	13.0	21.0
2	冯新	吉林大学动物医学学院	56	378	10.0	16.0
3	闫广谋	吉林大学动物医学学院	12	61	4.0	7.0
4	王爽	吉林大学动物医学学院	96	539	11.0	20.0
5	顾敬敏	吉林大学动物医学学院	23	136	7.0	11.0
6	吕萌	吉林大学动物医学学院	3	9	1.0	3.0