副猪嗜血杆菌种特异性基因的筛选与鉴定

• 作者: 刘娇 周泷 崔宁 张艳禾 李刚 李继昌 牛惠 王春来 谢芳
• 来源期刊: 东北农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 副猪嗜血杆菌 抑制消减杂交 种特异性基因 鉴定
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 79-83
• 页数: 5页
• 分类号: S852.61
• 字数: 3192字
• 语种: 中文

摘要

为筛选副猪嗜血杆菌（HPS）种特异性的基因，采用抑制消减杂交（SSH）技术，以HPS DNA为Tester，以猪胸膜肺炎放线杆菌（APP）DNA为Driver，通过2轮消减杂交和2次PCR扩增，将第2次PCR产物连接pMD19-T载体，转化大肠杆菌DH5α感受态细胞，筛选阳性克隆后测序，经Southern Blot验证和BLAST分析，获得6个HPS特异基因片段。研究为建立副猪嗜血杆菌基因鉴别诊断方法及ELISA抗原靶标的鉴定奠定基础。