副猪嗜血杆菌oppA基因的克隆、表达及间接ELISA检测方法的建立

• 作者: 吴学敏 周伦江 庄向生 江斌 王隆柏 车勇良 陈如敬 魏宏
• 来源期刊: 《福建农林大学学报（自然科学版）》
• 关键词: 副猪嗜血杆菌 寡肽结合蛋白基因 克隆 表达 间接ELISA
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 282-288
• 页数: 7页
• 分类号: S852.61
• 语种: 中文
• DOI: 10.13323/j.cnki.j.fafu(nat.sci.).2015.03.011

摘要

采用PCR方法扩增副猪嗜血杆菌(Hps)的寡肽结合蛋白(OppA)基因,序列测定结果表明,扩增片段全长1654 bp.将扩增片段插入表达载体pGEX-6P-1中,转化BL21进行诱导表达,SDS-PAGE电泳结果表明,重组融合蛋白大小约为87 ku,以纯化的重组蛋白OppA作为抗原,建立Hps抗体的间接ELISA检测方法.通过试验确定最佳的反应条件为:抗原包被浓度为1.0 μg·孔-1,于37℃包被1h,待检血清的稀释度为1∶50,阳性判断标准(D450nm)大于0.643.特异性和重复性试验结果表明,建立的间接ELISA方法具有良好的特异性和稳定性,可用于Hps抗体的检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	江斌	福建省农业科学院畜牧兽医研究所	133	303	8.0	11.0
2	王隆柏	福建省农业科学院畜牧兽医研究所	52	356	12.0	17.0
3	庄向生	福建省农业科学院畜牧兽医研究所	40	369	11.0	17.0
4	陈如敬	福建省农业科学院畜牧兽医研究所	30	215	9.0	14.0
5	魏宏	福建省农业科学院畜牧兽医研究所	29	203	9.0	13.0
6	车勇良	福建省农业科学院畜牧兽医研究所	26	223	10.0	14.0
7	吴学敏	福建省农业科学院畜牧兽医研究所	19	126	6.0	11.0