建立脑双位点微透析结合高效液相色谱-柱后固定化酶反应器-电化学方法同步监测大鼠腹内侧前额叶皮质和海马中乙酰胆碱和胆碱含量

• 作者: 刘洋 孙丹丹 崔悦 张美玉 王丹巧 蔡铁全
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脑双位点微透析 高效液相色谱法 固定化酶反应器 电化学 乙酰胆碱 胆碱
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 实验方法
• 页码范围: 97-106
• 页数: 10页
• 分类号: R965.2
• 字数: 7194字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2014.01.015

摘要

目的 建立同步动态监测清醒自由活动状态下大鼠腹内侧前额叶皮质(mPFC)和海马细胞外液中乙酰胆碱(ACh)和胆碱(Ch)方法,用于药物干预下不同脑区胆碱类神经递质变化研究.方法 建立mPFC和海马双位点双通道同步微透析采样技术和高效液相色谱-柱后固定化酶反应器-电化学(HPLC-IMER-ECD)方法.通过对清醒自由活动大鼠mPFC和海马同步灌流透析取样,HPLC-IMER-ECD分析药物作用下大鼠mPFC和海马细胞外液中ACh和Ch的动态变化,验证该技术方法的可行性和适用性.结果大鼠mPFC和海马双套管植入术及透析采样后状态表现良好,表明脑双位点双通道同步微透析采样技术可行.HPLC-IMER-ECD 法测定ACh和Ch,两者浓度在0.02~2.00 μmol·L-1范围内线性关系良好,ACh最低检测限为10 nmol·L-1,Ch最低检测限为5 nmol·L-1(信噪比为3∶1).ACh 0.1,0.4和2.0 μmol·L-1日内精密度相对标准偏差为0.87%~1.83%,日间精密度为5.38%~6.80%; Ch日内精密度相对标准偏差为1.60%~2.91%,日间精密度相对标准偏差为5.56%~7.38%;ACh相对回收率为96.0%~113.0%,Ch为102.3%~109.2%.叠氮钠能明显降低mPFC和海马细胞外液中ACh(P<0.05),但能显著升高两脑区内Ch含量(P<0.05).人参皂苷Rg1可逆转叠氮钠导致的海马区ACh降低(P<0.05)及mPFC和海马区Ch含量的升高(P<0.05).mPFC细胞外液中ACh和Ch较高,受到叠氮钠影响较海马区更敏感.结论 脑双位点微透析结合HPLC-IMER-ECD方法能同步监测大鼠mPFC和海马中ACh和Ch含量变化.人参皂苷Rg1可通过调节脑内ACh和Ch动态平衡,增强中枢胆碱能系统的功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王丹巧	中国中医科学院医学实验中心	58	639	13.0	22.0
2	刘洋	中国中医科学院医学实验中心	62	199	8.0	12.0
3	孙丹丹	中国中医科学院医学实验中心	9	46	4.0	6.0
4	张美玉	中国中医科学院医学实验中心	18	96	6.0	9.0
5	蔡铁全		14	53	5.0	7.0
6	崔悦	中国中医科学院医学实验中心	2	4	1.0	2.0