吡喹酮压力下日本血吸虫耐药性的诱导和虫体差异表达蛋白的分析

• 作者: 关志勋 夏超明 曹蕴 梁松 王言言 董兰兰 许静 赵波
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 日本血吸虫 吡喹酮 ED50 耐药性 蛋白质组学 差异表达
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 论 著
• 页码范围: 1171-1180
• 页数: 10页
• 分类号: R383.2
• 字数: 7290字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2014.12.001

摘要

目的：分析经吡喹酮（PZQ ）半数有效量（ED50）诱导虫体与未诱导虫体之间的差异表达蛋白，为阐明 PZQ的作用机制，探索候选疫苗靶抗原及药物治疗靶点，提供实验依据。方法应用 PZQ ED50（25．98 mg／kg ），对单性感染4周后ICR鼠连续灌胃给药30 d ，停药21 d后，再给予治疗剂量（200 mg／kg ）连续灌胃5 d ，肝门静脉灌注法收集成虫体外培养，观察虫体对PZQ的敏感性。收集诱导虫体和未诱导虫体，利用2D‐DIGE分离差异蛋白，并予MALDI‐TOF‐MS鉴定，进而在线 Uni‐prot软件检索差异蛋白功能。结果诱导成虫在8倍未诱导成虫临界致死浓度（112μmol／L）PZQ作用下，仍有75．6％存活率，与未诱导成虫临界致死浓度组相比差异有统计学意义（ P＜0．05）。诱导虫体和未诱导虫体共确认有30个差异表达蛋白，其中12个蛋白表达上调，18个蛋白表达下调，主要是细胞骨架相关蛋白、细胞中参与糖代谢和能量代谢的酶类、氧化还原酶类以及应激蛋白和参与解毒代谢的蛋白酶等。结论诱导虫体对PZQ敏感性下降显著，显示出明显的耐受性。诱导后，蛋白表达上调或下调提示PZQ诱导促进或抑制了某些特定基因的表达。为深入阐明PZQ作用机制，探索新的疫苗候选抗原及药物治疗的靶点，提供科学依据，同时为研发抗血吸虫新药开拓新途径和新思路。