巴西橡胶树第9染色体的显微分离及微克隆文库的构建

• 作者: 庄南生 王英 陈学俊 高佳佳 高和琼
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 巴西橡胶树 显微分离 微克隆 单染色体文库
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 966-972
• 页数: 7页
• 字数: 4530字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2014.08.006

摘要

橡胶是我国的重要的战略物资,深入研究橡胶树基因组具有重要意义.本实验以巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)热研7-33-97幼叶为材料,采用酶解去壁低渗法制片,玻璃针显微分离法成功分离出橡胶树单染色体.单染色体经蛋白酶消化、Sau3A核酸内切酶酶切和两轮LA-PCR(接头连接PCR)扩增.得到250～2 000 bp之间的DNA片段,通过Southern blot对单染色体产物进行验证,结果表明扩增片段与巴西橡胶树基因组DNA之间有同源性.从而说明单染色体DNA已被成功的扩增.采用荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)验证分离出的是第9号染色体,构建了橡胶树第9号染色体微克隆文库.克隆片段长度在300～1 200 bp,平均为650 bp左右,文库包含48 000个克隆,空载率为1％.本研究从巴西橡胶树单染色体入手,运用单染色体微分离、微克隆技术,构建了巴西橡胶树单染色微克隆文库,为橡胶树基因组研究提供了新的思路与方法,为更好地开展橡胶树分子辅助育种提供技术方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王英	海南大学农学院	48	301	9.0	15.0
3	高和琼	海南大学农学院	29	166	7.0	12.0
4	庄南生	海南大学农学院	54	449	9.0	19.0
6	高佳佳	海南大学农学院	2	5	1.0	2.0
11	陈学俊	海南大学农学院	3	7	2.0	2.0