小鼠血清中杀O139霍乱弧菌抗体检测方法的初步建立

• 作者: 乔瑞洁 刘月萍 吴朝今 李燕婷 王浩 范锋锋 谢贵林 谭小梅 赵志强
• 来源期刊: 微生物学免疫学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 霍乱 霍乱弧菌 O139 小鼠免疫血清 杀弧菌抗体 滴度
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 24-30
• 页数: 7页
• 分类号: R378.91+1
• 字数: 5551字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13309/j.cnki.pmi.2014.06.005

摘要

目的 研究探索O139霍乱弧菌杀弧菌抗体的检测方法.方法 用微孔板培养和琼脂平板克隆计数相结合的杀弧菌抗体检测方法,对实验菌株及稀释度、补体浓度等关键参数进行筛选;对50份小鼠免疫血清进行杀弧菌抗体滴度检测,并与O139群霍乱弧菌LPS IgG抗体滴度进行相关分析;对该方法的特异性、线性和精密性进行了验证.结果 筛选出最佳菌株为20100603菌株,最佳稀释度倍数为2 000倍,补体最佳稀释倍数为16倍.O139群霍乱弧菌小鼠免疫血清检测到较高的杀弧菌抗体滴度而PBS小鼠免疫血清未检测到杀弧菌抗体滴度.小鼠免疫血清杀弧菌抗体滴度与O139群霍乱弧菌LPS IgG抗体滴度之间存在正相关关系.验证结果显示,在抑制剂浓度达到1.0 ～2.0 A600时,抑制率100％;线性回归方程为y=-1.093x+5.058,其相关系数为-0.999,P＜0.05;方法批内CV值为15.72％,批间CV值为23.47％.结论 初步建立了O139霍乱弧菌杀弧菌抗体的检测方法,该方法具有较高的特异性、线性和精密度.