柞蚕滞育关联蛋白基因dap2的表达特征及分子特性

• 作者: 张耀洲 杨晓丽 毕臻乐 舒特俊 陈健 陈剑清
• 来源期刊: 浙江理工大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 柞蚕 滞育关联蛋白2 眼色素结合蛋白 荧光定量PCR 免疫印迹分析
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 生物与生命科学
• 页码范围: 721-727
• 页数: 7页
• 分类号: Q812
• 字数: 4926字
• 语种: 中文

摘要

滞育关联蛋白(DAP)在昆虫滞育进程中可能发挥重要作用.从NCBI获取柞蚕滞育关联蛋白基因2(Antheraea pernyi diapause-associated protein 2,dap2)的序列,序列分析表明该基因的cDNA全长1 187 bp,ORF为874 bp,编码278个氨基酸.NCBI数据库氨基酸序列比对,DAP2与烟草天蛾和家蚕的眼色素结合蛋白(ommin-binding protein,OBP)同源性分别达到57％和58％.通过荧光定量PCR和Western blotting方法,分别检测柞蚕不同发育时期和五龄幼虫不同组织中dap2的转录表达水平,结果表明dap2在滞育蛹中转录和表达水平最高;在5龄幼虫不同组织中的分析表明其转录水平在脂肪体和血淋巴中最高,在翻译水平上血淋巴中表达最高.分离纯化后,对天然DAP2蛋白分子特性进行初步研究,吸收光谱分析不能表明其携带色素,去糖基化修饰分析表明其为糖蛋白,双向电泳表明其可能存在三种不同程度的翻译后修饰,推测其可能是柞蚕的一种眼色素结合蛋白(ommin-binding protein,OBP).