变异链球菌LuxS缺陷株甲基循环通路的恢复构建

• 作者: 何智妍 唐子圣 朱彩莲 江文欣 王玉霞 马瑞 高丽 黄正蔚
• 来源期刊: 上海口腔医学
• 学科: 医学
• 关键词: 变异链球菌 生物膜 密度感应 LuxS SahH
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 385-390
• 分类号: R780.2
• 语种: 中文

摘要

目的:以变异链球菌LuxS缺陷株为模型,构建其密度感应缺陷的甲基循环恢复株.方法:以LuxS为阳性表达对照,通过在变异链球菌LuxS缺陷株中异源表达SahH,实现其代谢通路的恢复构建.通过Western印迹、反转录PCR和信号分子AI-2分泌检测,验证目的蛋白的表达.采用SAS8.0软件包对数据进行统计学分析.结果:Western 印迹检测2种蛋白在大肠杆菌中均得到正确表达,验证了克隆载体的正常表达能力;反转录PCR验证了变异链球菌LuxS缺陷株中luxS及sahH mRNA的存在:发光实验证实LuxS阳性表达对照株AI-2的分泌能力恢复.结论:成功构建变异链球菌LuxS缺陷的代谢恢复株,为探讨LuxS的调控机制提供了分子生物学工具及实验对照.