变形链球菌luxS基因同源重组克隆载体的构建实验

• 作者: 刘正 黄正蔚
• 来源期刊: 华西口腔医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 变形链球菌 luxS基因 同源重组克隆载体
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 专栏论著
• 页码范围: 70-72
• 页数: 3页
• 分类号: R781.1
• 字数: 2253字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-1182.2006.01.021

摘要

目的构建luxS基因的同源重组克隆载体以备将来进行luxS基因同源重组knockout突变株的研究.方法利用高保真的pfu DNA聚合酶,通过嵌套式PCR的方法,分别扩增出变形链球菌luxS基因的上下游片段(Xup,Xdn)以及大肠杆菌pH 1+质粒的卡那霉素抗性基因片段(Kana),依次采用相应的双酶切反应将这些片段连接入噬菌体载体pBluescriptRSK(+)Phagemids,以构建目的质粒Xukd-pbsk重组载体.结果经酶切鉴定目的质粒各片段插入无误,插入片段的测序报告也显示碱基无错配,含目的质粒的菌株可在含30 mg/L卡那霉素的LB培养基内生长良好,证明插入的卡那霉素抗性基因体外表达良好.结论本研究构建的变形链球菌luxS基因同源重组克隆载体正确,可用于今后对于变形链球菌luxS基因突变株构建的研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘正	上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔内科	10	52	4.0	6.0
2	黄正蔚	上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔内科	10	34	4.0	5.0