利用Lifeact法检测恶性疟原虫F-actin的研究

• 作者: 张青锋 潘卫庆 王卫峰
• 来源期刊: 同济大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 恶性疟原虫 纤维状肌动蛋白 免疫共沉淀
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 44-48
• 分类号: R382.3+1
• 字数: 4238字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn1008-0392.2014.06.009

摘要

目的 通过构建游离表达绿色荧光蛋白融合Lifeact多肽(Lifeact-GFP)的转基因虫株,在不影响恶性疟原虫actin动态平衡的前提下特异标识纤维状肌动蛋白(F-actin),为研究F-actin在恶性疟原虫中的特性及其对毒力基因的转录调控作用打下基础.方法 构建重组转染质粒Lifeact-GFP/pLN,经电转化方法将质粒转入恶性疟原虫3D7标准虫株中,BSD药物筛选获得携带游离Lifeact-GFP/pLN质粒的转基因虫株,并经免疫印迹(Western Blot)和活细胞荧光检测,证实Lifeact-GFP融合基因的细胞内表达,以期通过免疫共沉淀实验(Co-IP)检测Lifeact与恶性疟原虫F-actin的相互作用.结果 成功获得了恶性疟原虫Lifeact-GFP转基因虫株,并通过Westem Blot和荧光检测证实Lifeact-GFP成功获得表达;但是,免疫共沉淀实验结果初步显示,Lifeact不能直接结合恶性疟原虫F-actin.结论 虽然Lifeact多肽能在酵母等细胞中特异结合F-actin,但是不能直接识别恶性疟原虫F-actin.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张青锋	同济大学医学院	10	28	4.0	4.0
2	潘卫庆	同济大学医学院	17	52	5.0	6.0
3	王卫峰	同济大学医学院	1	0	0.0	0.0