恶性疟原虫带7蛋白家族蛋白Cdna的克隆及表达产物特征分析

• 作者: 张玲 张连惠 王恒 王海一
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 带7蛋白 stomatin样蛋白 恶性疟 原核表达
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 181-184
• 页数: 4页
• 分类号: R382.31|R349.6
• 语种: 中文

摘要

目的分离、克隆恶性疟原虫带7蛋白家族蛋白编码基因pfstom,并对其功能进行初步研究.方法根据国际恶性疟研究公共数据库释放的已完成序列数据(CoDing Sequence,CDS数据)设计引物,用RT-PCR方法从恶性疟原虫中国海南株(FCC1/HN)中得到其带7蛋白家族蛋白基因cDNA-pfstom.应用多种软件对其结构功能、基因进化特征以及同源性分析.用pET30a系统表达其具有stomatin样蛋白结构域的C端蛋白,免疫新西兰大白兔并纯化抗体.Western杂交检测其在FCC1/HN表达情况.结果pfstom基因编码区全长1 125 bp,编码374个氨基酸,C端具有和人红细胞整合膜蛋白带7蛋白家族中stomatin样蛋白类似的结构.进化特征分析显示:在带7蛋白家族中,Pfstom蛋白与stomatin样蛋白亲缘关系较近.Western杂交发现Pfstom蛋白在FCC1/HN的滋养体期呈期特异性表达,在与膜相关和与膜不相关的感染红细胞蛋白提取物中都存在.结论Pfstom是带7蛋白家族蛋白,在FCC1/HN红内期的滋养体期呈特异性表达,环状体期不表达,该蛋白是膜相关蛋白.