恶性疟原虫组氨酸富集蛋白Ⅱ抗原基因在大肠杆菌中的表达及表达蛋白的活性鉴定研究

• 作者: 余新炳 方建民 潘波 王善青 罗树红 蔡贤铮
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 恶性疟原虫 组氨酸富集蛋白Ⅱ 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 1999,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 23-26
• 分类号: R3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.1999.01.008

摘要

目的恶性疟原虫组氨酸富集蛋白Ⅱ(Histidine-rich protein Ⅱ,HRPⅡ)是疟原虫红内期生活史过程中从感染红细胞分泌至血浆中的水溶性抗原,是重要的诊断用抗原.本文通过实现恶性疟原虫HRP Ⅱ在大肠杆菌中的表达,为研制用于疟疾诊断的抗HRP Ⅱ单克隆抗体奠定基础.方法将含有HRP Ⅱ抗原基因的重组表达质粒HRP Ⅱ/pET8c用钙法转化大肠杆菌BL21(DE3),重组子经聚合酶链反应(PCR)和Bam HI与BglⅡ双酶切鉴定.重组子HRP Ⅱ/pET8c/BL21(DE3)在28℃条件下,用1mM IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western免疫印迹分析表达产物.结果成功构建HRP Ⅱ/pET8c重组质粒,在低温条件下经IPTG诱导,HRP Ⅱ呈可溶性、非融合性表达,SDS-PAGE分析表明表达产物的分子量约33kDa,薄层扫描显示表达蛋白占菌体总蛋白的20.76%.Western免疫印迹表明,表达产物能被抗HRP Ⅱ人工合成九肽单克隆抗体特异识别.结论恶性疟原虫HRP Ⅱ在原核表达系统pET8c/BL21(DE3)中获得成功表达,为基因工程大规模制备生产HRP Ⅱ抗原奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余新炳	中山医科大学寄生虫学教研室	101	467	11.0	17.0
2	王善青		30	240	9.0	14.0
3	潘波		31	165	8.0	11.0
4	方建民	中山医科大学寄生虫学教研室	12	27	2.0	5.0
5	罗树红	中山医科大学寄生虫学教研室	10	17	2.0	3.0
6	蔡贤铮		6	21	3.0	4.0