恶性疟原虫裂殖子新型蛋白质(PF3D7_0811600)的表达纯化及其多克隆抗体的制备

• 作者: 周健华 姜宁 常志广 陆慧君 陈启军 魏晓燕
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 恶性疟原虫 裂殖子 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 页码范围: 218-222
• 分类号: S855.99
• 语种: 中文
• DOI: 10.13327/j.jjlau.2015.2717

摘要

利用大肠杆菌原核表达并纯化恶性疟原虫3D7株裂殖子新型蛋白质PF3 D7_0811600,免疫家兔制备特异性多克隆抗体,通过对虫体天然蛋白的识别,分析PF3D7_0811600在虫体内的表达.采用PCR技术从恶性疟原虫3D7株总DNA中获得PF3 D7_0811600基因的目的片段,连接到pMD18-T克隆载体,得到的克隆质粒经EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切后,构建重组原核表达质粒pET-PF3D7_0811600和pGEX-PF3D7_0811600,通过优化表达条件,分别在大肠杆菌中得到高效表达,并用亲和层析柱纯化目的蛋白质.用纯化的His标签重组蛋白质免疫家兔,用Western Blot方法检测制备的特异性多克隆抗体.结果表明:成功纯化并获得重组蛋白质,用间接ELISA方法检测多抗效价达到1∶16000,用Western Blot检测结果表明制备的多克隆抗体具有良好的特异性,能够识别虫体天然蛋白.恶性疟原虫3D7株裂殖子新型蛋白质PF3D7_0811600在虫体晚期表达,说明该蛋白在虫体发育的晚期发挥重要作用,猜测其可能与裂殖子入侵宿主红细胞有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陆慧君	吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病教育部重点实验室	39	161	8.0	10.0
2	陈启军	吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病教育部重点实验室	18	210	6.0	14.0
3	姜宁	吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病教育部重点实验室	18	93	5.0	9.0
4	常志广	吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病教育部重点实验室	5	7	2.0	2.0
5	周健华	吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病教育部重点实验室	3	2	1.0	1.0
6	魏晓燕	吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病教育部重点实验室	1	2	1.0	1.0