TeiR融合蛋白分离及多克隆抗体的制备

• 作者: 周以飞 林彬辉 潘大仁 潘菲 艾育芳 郭玉春 陈建秋
• 来源期刊: 《福建农林大学学报（自然科学版）》
• 关键词: 睾丸酮丛毛单胞菌 teiR SDS-PAGE 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 255-259
• 页数: 5页
• 分类号: X172
• 语种: 中文

摘要

提取睾丸酮丛毛单胞菌(Comamonas testosteroni)基因组DNA,PCR扩增teiR基因,将扩增产物克隆到pET28a中,经酶切验证后获得teiR基因表达载体pET28a-teiR.将重组质粒转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21,添加终浓度为1 mmol·L-1的IPTG进行诱导,提取细菌总蛋白进行蛋白的SDS-PAGE电泳.并根据融合蛋白特性,利用Ni-NTA Spin Column对TeiR融合蛋白进行分离纯化,经分离纯化后的重组蛋白在SDS-PAGE上呈现出单一条带.进一步以获得的TeiR融合蛋白为抗原,制备兔抗TeiR多克隆抗体,经ELISA测定该抗体的效价为1∶10000,该抗体与睾丸酮丛毛单胞菌天然TeiR蛋白反应良好,说明该抗体特异性良好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘大仁	福建农林大学生命科学学院	87	682	14.0	21.0
2	周以飞	福建农林大学作物科学学院	50	446	11.0	18.0
3	郭玉春	福建农林大学作物科学学院	55	1640	20.0	40.0
4	陈建秋	福建农林大学作物科学学院	7	31	4.0	5.0
5	艾育芳	福建农林大学生命科学学院	15	127	7.0	11.0
6	潘菲	福建农林大学生命科学学院	4	8	2.0	2.0
7	林彬辉	福建农林大学生命科学学院	2	5	1.0	2.0