恶性疟原虫FCC1/HN株嘌呤核酸磷酸化酶(PNP)基因的克隆和原核表达

• 作者: 伍忠銮 余新炳 吴忠道 徐劲 李宝华 陈守义
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 恶性疟原虫 嘌呤核酸磷酸化酶 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 522-525
• 页数: 4页
• 分类号: R382.3
• 字数: 2409字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2004.06.017

摘要

目的从恶性疟原虫基因组中扩增、克隆恶性疟原虫嘌呤核酸磷酸化酶(PNP)基因,并进行原核表达产物.方法根据恶性疟原虫FCB株嘌呤核酸磷酸化酶基因编码序列,设计一对引物,引入EcoRⅠ和XhoⅠ.采用PCR技术从恶性疟原虫FCC/HN株基因组DNA中特异扩增PNP基因.纯化后扩增产物用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后,定向克隆入原核质粒pET30a(+)和真核质粒pcDNA3,重组质粒pET30a(+)-PNP转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选阳性重组子后,用PCR、EcoRⅠ+XhoⅠ双酶切和DNA序列测定鉴定.用IPTG诱导重组质粒pET30a(+)-PNP表达融合蛋白.结果从恶性疟原虫FCC1/HN株基因组中特异扩增出PNP基因,将扩增的目的基因正向插pET30a(+)和pcDNA3表达质粒的EcoRⅠ和XhoⅠ位点;重组子pET30a(+)-PNP在大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达中表达,表达融合蛋白分子量为31.4kDa.结论从恶性疟原虫基因组中获取PNP基因,并成功构建pET30a(+)-PNP和pcDNA3-PNP重组质粒,获得PNP原核表达产物.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余新炳	中山大学中山医学院寄生虫学教研室	201	1352	17.0	28.0
2	吴忠道	中山大学中山医学院寄生虫学教研室	171	835	14.0	21.0
3	李宝华	中山大学中山医学院寄生虫学教研室	4	6	2.0	2.0
4	徐劲	中山大学中山医学院寄生虫学教研室	104	568	13.0	17.0
5	陈守义	中山大学中山医学院寄生虫学教研室	31	211	8.0	13.0
6	伍忠銮	中山大学中山医学院寄生虫学教研室	14	38	2.0	6.0