恶性疟原虫ABRA基因真核表达重组质粒的构建及序列分析

• 作者: 余新炳 单志新 卞国武 李学荣 胡旭初 马长玲
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 恶性疟原虫 酸碱氨基酸重复抗原 聚合酶链式反应 克隆 序列分 析
• 年，卷（期）: 2001,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 16-20
• 页数: 5页
• 分类号: R382.3+1
• 字数: 3974字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2001.05.004

摘要

目的构建恶性疟原虫海南(FCC1/HN)株ABRA基因真核表达重组质粒pcDNA3-ABRA;测定ABRA基因序列,并了解FCC1/HN株与其它分离株ABRA序列的差异.方法根据ABRA基因已知序列设计合成一对引物,用PCR技术从FCC1/HN株基因组 DNA中扩增ABRA基因;将ABRA基因定向克隆入真核表达载体pcDNA3,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞;用酶切,PCR扩增鉴定筛选到的重组质粒阳性克隆.以正确的重组质粒为模板, 用双脱氧链末端终止法测定ABRA基因序列,应用软件辅助分析ABRA序列及进行同源性比较. 结果 PCR扩增得到特异的FCC1/HN株ABRA基因;经双酶切及PCR鉴定表明获得正确的pcDNA3-ABRA重组质粒.测序表明,FCC1/HN株ABRA基因大小为2220bp,编码739 个氨基酸.恶性疟原虫FCC1/HN株与Camp,3D7,FC27株ABRA基因编码氨基酸序列主要在C-端存在少量不同;FCR3株与以上4株ABRA基因编码氨基酸序列相比,只有少量的氨基酸替换. 结论从恶性疟原虫FCC1/HN株基因组DNA中获取ABRA基因,成功构建真核表达重组质粒pcDNA3-ABRA,并测定了FCC1/HN株ABRA基因的序列;FCC1/HN株与其它分离株A BRA基因有很高的同源性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	单志新	中山医科大学寄生虫学研究室	21	56	5.0	7.0
2	余新炳	中山医科大学寄生虫学研究室	101	467	11.0	17.0
3	李学荣	中山医科大学寄生虫学研究室	17	50	2.0	7.0
4	马长玲	中山医科大学寄生虫学研究室	24	40	4.0	6.0
5	胡旭初	中山医科大学寄生虫学研究室	4	2	1.0	1.0
6	卞国武	中山医科大学寄生虫学研究室	14	71	6.0	8.0